細胞技術(shù)專題：腫瘤細胞的軟瓊脂集落培養(yǎng)實驗
更新時間：2014-02-20 瀏覽次數(shù)：1597
標簽： 腫瘤 軟瓊脂 集落
在體外培養(yǎng)基中由一個祖先細胞增殖形成的細胞團，稱之為集落。腫瘤細胞能無限繁殖，所以具有這種能力，而成熟分化的細胞則不能形成集落。
實驗方法
- 基本方案
| 實驗方法原理 | HL-60細胞是一種急性早幼粒細胞白血病細胞，在體外無需加刺激因子，可在軟瓊脂培養(yǎng)基中形成集落。二甲基亞砜是一種細胞分化誘導(dǎo)劑，經(jīng)二甲基亞砜處理后的HL-60細胞按粒系途徑定向成熟分化，同時細胞的增殖力降低，幾乎全部細胞喪失了軟瓊脂中形成集落的能力。因此，這種方法可用于細胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗等方面。 |
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| 實驗材料 | HL-60細胞 |
| 試劑、試劑盒 | 小牛血清 RPMI1640培養(yǎng)液 臺盼蘭 瓊脂 二甲基亞砜 |
| 儀器、耗材 | 超凈工作臺 二氧化碳培養(yǎng)箱 顯微鏡 培養(yǎng)瓶 吸管 酒精燈 血細胞計數(shù)板 多孔培養(yǎng)板 |
| 實驗步驟 | 1. 收集對數(shù)生長期的HL-60細胞，先按實驗十三測定細胞活力，然后調(diào)整細胞濃度，制成300~1 000活細胞/ml 的細胞懸液。
6. 然后移培養(yǎng)板或平皿于CO2培養(yǎng)箱中37℃進行培養(yǎng)。
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