生物化學技術專題：秦皮中七葉苷、七葉內酯的提取、分離和鑒定
更新時間：2014-01-09 瀏覽次數：3445
秦皮為本樨科白蠟樹屬植物白蠟樹（Fraxinus Chinensis Poxb）或苦瀝白蠟樹（F.rhynchophylla Hance）或小葉白蠟樹（F.bungeana DC）的樹皮,味苦，性微寒。具有清熱、燥濕、收澀作用。主治溫熱痢疾、目赤腫瘤等癥。
秦皮中含有多種內酯類成分及皂苷、鞣質等，其中主要有七葉苷、七葉內酯、秦皮苷及秦皮素等。多有抗菌消炎的生理活性，七葉內酯對細菌性痢疾、急性腸炎有較好治療效果，兼有退熱作用，毒付作用小，幾無苦味。適于小兒服用。
秦皮中主要成分的結構及性質
1．七葉苷（esculin），又叫馬粟樹皮苷：白色粉末狀結晶，mp205～206℃。易溶于熱水（1：15），可溶于乙醇（1：24），微溶于冷水（1：610），難溶于乙酸乙酯，不溶于乙、氯仿。在稀酸中可水解。水溶液中有藍色熒光。
2．七葉內酯（esculetin）：黃色針狀結晶，mp276℃。易溶于沸乙醇及氫氧化鈉溶液，可溶于乙酸乙酯，稍溶于沸水，幾不溶于乙、氯仿。
3．秦皮苷（fraxin）：mp205℃。
4．秦皮素（fraxetin）：mp227～228℃。
實驗原理
七葉苷、七葉內酯均能溶于沸乙醇，可用沸乙醇將二者提取出來，再利用二者在乙酸乙酯中的溶解性不同而分離之。
實驗方法
（一）提取：取秦皮粗粉150g于索氏提取器中，加400ml乙醇回流10-12小時，得乙醇提取液，減壓回收溶劑至浸膏狀，即得總提取物。
（二）分離：在上述浸膏中加40ml水加熱溶之。移于分液漏斗中，以等體積氯仿萃取二次，將氯仿萃取過的水層蒸去殘留氯仿后加等積乙酸乙酯萃取二次，合并乙酸乙酯液，以無水硫酸鈉脫水，減壓回收溶劑至干，殘留物溶于溫熱甲醇中，濃縮至適量，放置析晶，即有黃色針狀結晶析出。濾出結晶。甲醇、水反復重結晶，即得七葉內酯。
將乙酸乙酯萃取過的水層濃縮至適量，放置析晶，即有微黃色晶體析出。濾出結晶。以甲醇，水反復重結晶，即得七葉苷。
（三）鑒定：
1．化學檢識：取七葉苷、七葉內酯各少許分別置試管中，加乙醇1ml溶解。加1%FeCl3溶液2-3滴，顯暗綠色，再滴加濃氨水3滴，加水6ml，日光下觀察顯深紅色。
2．薄層鑒定：
吸附劑：硅膠G
樣品：七葉苷、七葉內酯標準品及自制七葉苷﹑七葉內酯的醇溶液。
展開劑：甲醇-甲酸乙酯-甲苯（1：4：5）
顯色：1）UV254燈下觀察，七葉苷為灰色熒光，七葉內酯為灰褐色。
2）以重氮化對硝基苯胺噴霧顯色，七葉苷和七葉內酯均呈瑪瑙色。
結果：七葉苷Rf=0. 04，七葉內酯Rf=0.28
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