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專題:脂質體介導DNA轉染法
更新時間：2013-07-08 瀏覽次數：1674
細胞種類：COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat等任何一種細胞均可作為受體細胞。
1. 取6孔培養板（或用35mm培養皿），向每孔中加入2mL含1～2×105 個液，37℃CO2 培養至40%～60%匯合時（匯合過分，轉染后不利篩選細胞）。
3. 轉染準備：用2mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入1mL不含血清培養液。
4. 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6～24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。
1. 以5×105 細胞/孔接種6孔板（或35mm培養皿）培養24小時，使其達到50～60%板底面積。
①在1mL無血清DMEM中稀釋PSV2-neo質粒DNA或供體DNA。
3. 棄去細胞中的舊液，用1mL無血清DMEM洗細胞一次后棄去，向每孔中直接加入1mL DNA/脂質體復合物，37℃培養3～5小時。
4. 再于每孔中加入20%FCS的DMEM，繼續培養14～24小時，
5. 吸出DMEM/DNA/脂質體混合物加入新鮮10%FCS的DMEM，2mL/孔，再培養24～48小時。
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