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技術文章

Microbiologics公司推薦的各菌種的生長條件

更新時間:2013-03-09 瀏覽次數:4701

 

推薦生長條件
(適用于KWKK-STIK 和LYFO DISK 產品)
 
如何選擇的菌種生長條件
 
1.         zui初的生長是在非選擇性瓊脂培養基上。除非特殊情況或特別推薦,zui初的生長一般不考慮液體培養基。這是由于在液體培養基中獲得凍干菌株的純種比較困難,污染所帶來的雜菌可能會過度生長,影響得到目標菌株的純種。
 
2.         以下列出可供選擇的瓊脂培養基和相應的生長條件,供各實驗室培養菌種時參考。
 
方法 1
ü       胰蛋白胨大豆瓊脂,非選擇性羊血瓊脂,標準計數平板,或營養瓊脂-----35,正常環境,24-48小時。
方法 2
ü         非選擇性羊血瓊脂----- 35,正常環境,24-48小時。
方法 3
ü         巧克力瓊脂(含血紅蛋白和NAD)-----35,5%-10% CO2環境,24-48小時。
方法 4
ü         厭氧血瓊脂-----35℃,厭氧環境,48-72小時;
ü         部分專性厭氧菌可能需要5-7天,才能充分生長;
ü         對于梭菌,以下新鮮配制的平板也可選用:營養瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂和標準平板計數瓊脂(標準方法瓊脂);只是需額外培養24小時。
方法 5
ü         沙保氏葡萄糖Emmons瓊脂-----25正常環境,2-7天;
ü         沙保氏葡萄糖瓊脂-----25正常環境,2-7天;
ü         非選擇性羊血瓊脂也可選用;
ü         以下培養基也可選用:營養瓊脂,胰蛋白胨大豆瓊脂,馬鈴薯葡萄糖瓊脂和標準平板計數瓊脂,只是需額外培養24小時。
方法 6
ü         巧克力瓊脂(含血紅蛋白和NAD)-----35,微需氧環境,48-72小時。
方法 7
ü         Lowenstein Jensen瓊脂或Middlebrook瓊脂-----35℃,5%-10% CO2環境或正常環境,7天。
 
 
 
方法 8
ü         緩沖活性炭酵母提取物瓊脂-----35℃,正常環境,3-5天。
方法 9
ü         V 瓊脂或巧克力瓊脂-----35℃,5%-10% CO2環境,48小時。
方法 10
ü         腦心浸出液肉湯,胰蛋白胨大豆肉湯,或0.85%生理鹽水均可選用。
ü         非選擇性羊血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂-----35℃,正常環境,24-48小時。
方法 11
ü         先接種于MRS肉湯中-----35℃,正常環境,48小時;
然后接入含羊血的哥倫比亞CNA培養基中-----35℃,5% CO2環境,48小時。
方法 12
ü         馬鈴薯葡萄糖瓊脂-----45℃,正常環境,48-72小時。
方法 13
ü         取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養基中。作系列梯度稀釋(例如,1:10,1:100,1:1000,1:10000)。在35℃下,正常環境中培養。精氨酸瓶中液體一旦變成粉紅色(24-48小時),轉接0.1 mL到A-8瓊脂,劃線分離。人型支原體,35℃,5-10%CO2環境;解脲支原體,35℃,厭氧環境,培養96個小時。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法14
ü         取一顆凍干顆粒于SP4葡萄糖肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養基中。作系列梯度稀釋(例如,1:2,1:4,1:8,1:16,1:32)。在35℃下,正常環境中培養。一旦肉湯從紅色變成黃色(1-4周),轉接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂,劃線分離。不要使用棉質拭子或木質棒。35℃,CO2環境中,可以使用燭缸,培養5-15天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法15
ü         取一顆凍干顆粒于10 B 精氨酸肉湯中,若是KWIKSTIK則溶于自帶的培養基中。作系列梯度稀釋(例如,1:10,1:100,1:1000)。在35℃下,正常環境中培養。一旦肉湯從黃色變成粉紅色(48-72個小時),轉接0.2 mL到SP4葡萄糖瓊脂,劃線分離。不要使用棉棒或者木質棒,將平板至于35℃厭氧環境中培養3-6天。使用顯微鏡觀察平板菌落。
方法16
ü         Leeming Notman瓊脂,30℃下,正常環境中培養72個小時。
 
各類菌株的推薦培養方法如下: 
  
                                             
Acinetobacter sp.
不動桿菌屬
方法1
Acetobacter sp.
醋桿菌屬
方法3
注:25℃培養3-4天。
 
 
Actinobacillus sp.
放線桿菌屬 
方法3
Actinomyces sp.
放線菌屬
方法4
Aerococcus sp.
氣球菌屬
方法1
Aeromonas sp.
氣單胞菌屬
方法2
注:Aeromonas hydrophila (嗜水氣單胞菌應在30培養。Aeromonas salmonicida(殺鮭氣單胞菌應在25培養。
Alcaligenes  sp.
產堿桿菌 
方法1
Alicyclobacillus sp.
脂環酸芽孢桿菌

 
方法12

Alloiococcus sp. Method 2
 
 

 

Aneurinibacillus sp.
硫胺素芽孢桿菌屬
方法1
Aquaspirillum sp.
水螺菌屬
方法1
注:25℃培養6天。
 
 
Arcanobacterium sp.
隱秘桿菌屬
方法2
Arthrobacter sp.
節桿菌屬
方法1

 
注:25℃培養。

 
Aspergillus sp.

曲霉菌屬
方法5
Bacillus sp.
芽孢桿菌屬
方法1
注:一些芽孢桿菌屬經證明在室溫下保存后的傳代恢復率高于在2-8中保存的。
Bacteroides sp.
擬桿菌屬
方法4

 
注:Bacteroides ureolyticus(解尿素擬桿菌應培養5天,菌落很小。有時需要多傳1代以得到足夠的供試菌落。

Bifidobacterium sp.
雙岐桿菌屬
方法4
Bordela sp.
博德特氏菌屬
方法3
注:可能需要一周的培養時間;正常環境也可。
注:Bordela pertussis (百日咳桿菌) (MicroBioLogics 目錄號0843) 需添加了15%去纖維蛋白羊血的包姜氏(Bordet Gengou)培養基。
Brevibacillus sp.
短芽孢桿菌屬
方法1
Brevundimonas sp.
短波單胞菌屬

 
方法1

Brochothrix sp.
環絲菌屬
方法1
注:25℃培養。
 

 

Budvicia sp.
布戴約維采菌屬
方法1
注:25℃培養。
Burkholderia sp.
 伯克霍爾德菌屬

 
方法1

Campylobacter sp.
 彎曲桿菌屬
方法6

 
注:巧克力瓊脂是Campylobacter jejuni(空腸彎曲桿菌的zui適普遍生長培養基。在zui初的48小時培養期內不要揭開接過種的平皿。

Candida sp.
念珠菌屬
方法5
Capnocytophaga sp.
噬二氧化碳菌屬
方法3
Cellulosimicrobium sp.
纖維微細菌
方法1
Chryseobacterium sp.
金黃桿菌屬
方法1
Citrobacter sp.
檸檬酸桿菌屬
方法1
Cladosporium sp.
枝孢霉屬
方法5
Clostridium sp.
梭菌屬
方法4
注:Clostridium baratii(巴氏梭菌只在厭氧血平板上生長。
Corynebacterium sp.
棒桿菌屬
方法1
Cryptococcus sp.
隱球菌屬
方法5
注:Cryptococcus(隱球菌)需在25℃培養。
Deinococcus sp.
異常球菌屬
方法1
Delftia sp.
代爾夫特菌屬
方法1
Edwardsiella sp.
愛德華菌屬
方法1
Eggerthella sp.
埃格特菌
方法4
Eikenella sp.
埃肯菌屬
方法3
Enterobacter sp.
腸道菌屬
方法1
Enterococcus sp.
腸球菌屬
方法1
Erysipelothrix sp.
丹毒絲菌屬
方法2
Escherichia coli
大腸桿菌
方法1
Exiguobacterium sp.
微小桿菌屬
方法1
Finegoldia sp.
芬戈爾德菌
方法4
注:厭氧環境中培養72-96小時。
Flavobacterium sp.       產黃菌屬
方法1
注:30℃培養。
Fluoribacter sp.
熒光桿菌屬
方法8
Fusarium sp.
鐮刀菌屬
方法5
Fusobacterium sp.
梭桿菌屬
方法4
Gardnerella sp.
加德納氏菌屬
方法9
Gemella sp.
兼性雙球菌屬
方法4
Geobacillus sp.
地芽孢桿菌屬
方法1
注:Geobacillus stearothemophilus (嗜熱脂肪地芽孢桿菌需在55℃培養。Geobacillus stearothemophilusMBL貨號為0137,在羊血瓊脂上不能生長。
Geotrichum sp.
地絲菌屬
方法5
Haemophilus sp.
嗜血桿菌屬
方法3
Hafnia sp.
哈夫尼菌屬
方法1
Issatchenkia sp.
伊薩酵母屬
方法5
Kingella sp.
金氏桿菌屬
方法2
注:5-10% CO2 環境下培養。
Klebsiella sp.
克雷伯氏菌屬 
方法1
Kloeckera sp.
克勒克酵母屬
方法5
Kocuria sp.
庫克菌屬
方法1
K.糠疹應在25℃培養。
Lactobacillus sp.
乳酸桿菌 
方法2
注:L. acidophilus (嗜酸乳桿菌), L. casei (干酪乳桿菌), L. delbrueckii (德氏乳桿菌L.gasseri (加氏乳桿菌需用方法11
Lactococcus sp.
乳球菌屬
方法2
Leclercia sp.
勒克菌屬
方法1
Legionella sp.
軍團菌屬
方法8

 
Listeria sp.

李斯特菌屬
方法1
Macrococcus sp.
巨型球菌屬
方法1
Malassezia sp.
馬拉色氏霉菌屬
方法16
Mannheimia sp.
曼海姆菌
方法1
Methylobacterium sp.
甲基桿菌屬
方法1
注:25℃培養。在標準平板計數瓊脂上生長。
Microbacterium sp.
桿菌屬
方法1
注:30℃培養。
 
 
Micrococcus sp.
微球菌屬
方法1
注:胰蛋白胨大豆瓊脂或非選擇性的羊血瓊脂對于貨號03370689是的生長培養基。
Micromonas sp.
微單胞菌屬
方法4
注:Micromonas Micros(微小微單胞菌需在厭氧環境中培養5-7天。
Microsporum sp.
小孢菌屬
方法5
Microsporum canis(犬小孢子菌)在沙保氏葡萄糖瓊脂上生長困難。
Moraxella sp.
莫拉菌屬

 
方法2

Morganella sp.
摩根菌屬
方法1
Mycobacterium sp.
分枝桿菌屬
方法7

 
注:Mycobacterium gordonae (戈氏分枝桿菌), Mycobacterium terrae (地分枝桿菌Mycobacterium Tuberculosis (結核病分枝桿菌可能需要一個月的培養時間。

支原體屬
注: Mycoplasma hominis(人型支原體)必須按照方法13Mycoplasma orale(口腔支原體)必須按照方法15Mycoplasma pneumoniae(肺炎支原體)必須按照方法14.

 
Myroides sp.

香味菌
方法 2
Neisseria sp.
奈瑟菌屬
方法 3
注:巧克力平板是Neisseria sp.(奈瑟菌的zui適普遍生長培養基。在zui初的48小時培養期內不要揭開接過種的平皿。
Nocardia sp.
諾卡氏菌屬
方法1
Novosphingobium sp.
鞘脂單胞菌屬
方法1

 
注:25℃培養。

 
 
Ochrobactrum sp.
蒼白桿菌
方法1

 
Oligella sp.

寡源桿菌屬
方法2
Paecilomyces sp.
擬青霉屬
方法5
Paenibacillus sp.
類芽胞桿菌屬
方法1
Parabacteroides
 
方法4
Pasteurella sp.
巴斯德菌屬
方法2
Pediococcus sp.
片球菌屬
方法11
注:Pediococcus damnosus(有害片球菌需從MRS肉湯轉入MRS瓊脂上次代培養,需在25℃培養。
Penicillium sp.
青霉菌屬

 
方法5

Peptoniphilus sp.
嗜胨菌
方法4
注:在厭氧環境中培養72-96小時。
Peptostreptococcus sp.
消化鏈球菌屬
方法4
Plesiomonas sp.
毗鄰單胞菌屬
方法1
Porphyromonas sp.
卟啉菌屬
方法4
注:需在厭氧環境培養5-7天。
Prevola sp.
普雷沃菌屬
方法4
注:需在厭氧環境培養5-7天。
Propionibacterium sp.
丙酸菌屬
方法4
注:需在厭氧環境培養3-5天。
Proteus sp
變形菌屬
方法1
Prototheca sp.
原壁菌屬
方法5
Providencia sp.
普羅威登斯菌屬
方法1
Pseudomonas sp.
假單胞菌屬
方法1
注:Pseudmonas fluorescens(熒光假單胞菌應在25℃培養,假單胞菌屬(MicroBioLogics 目錄號0162) 應在30℃培養。
Ralstonia sp.
雷爾氏菌
方法1
Raoulla sp.
拉烏爾菌
方法1
Rhizopus sp.
根霉菌屬
方法5
Rhodococcus sp.
紅球菌屬
方法2
Rhodotorula sp.
紅酵母屬
方法5
Saccharomyces sp.
酵母菌屬
方法5
注:沙保氏葡萄糖瓊脂和沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂是Saccharomyces sp.(酵母菌屬)生長的zui適培養基。
Salmonella sp.
沙門氏菌屬         方法1
Scopulariopsis sp., ,
帚霉屬
方法5
Serratia sp.
粘質沙雷菌
方法1
Shewanella sp.
希瓦氏菌屬
方法10
Shigella sp.
志賀菌屬
方法1
Sordaria sp.
糞殼菌屬
方法5
Sordaria sp.(糞殼菌屬)在沙保氏葡萄糖Emmons 瓊脂上比在沙保氏葡萄糖瓊脂上更易形成孢子。
Sphingobacterium sp.
鞘氨醇桿菌屬
方法1
Sphingomonas sp.
鞘氨醇單胞菌屬
方法1
注:25℃培養。
 
 
Staphylococcus sp.
葡萄球菌屬
方法1
注:對于金黃色葡萄球菌,MBL貨號為0158,對萬古霉素的耐受力隨著菌齡、培養基種類、傳代數變化而降低,傳菌zui適是在腦心浸出液瓊脂中加入4 mg/L萬古霉素。
Stenotrophomonas sp.
寡養單胞菌
方法1
Streptococcus sp.
鏈球菌屬
方法2
注:Streptococcus cricetus(大鼠鏈球菌應在微需氧環境培養。Streptococcus sp.(鏈球菌屬)(MicroBioLogics貨號 #0978) 應在CO2中生長。
Streptomyces sp.
鏈霉菌屬
方法5

 
注:Streptomyces sp.(鏈霉菌屬)不能在馬鈴薯葡萄糖瓊脂上生長。

Thermoanaerobacterium sp.
高溫厭氧芽孢桿菌屬
方法4
注:T. thermosaccharolyticum (嗜熱細菌熱解糖熱厭氧桿菌,MicroBioLogics目錄號0728) 的zui初生長培養基應為庖肉培養基。45° C,培養72小時。然后接種至厭氧血平板上培養,45° C72 小時,厭氧環境培養。
Trichophyton sp.
發癬菌屬
方法5
Trichosporon sp.
毛孢子菌屬
方法5
Ureaplasma sp.
脲原體屬
方法13
Veillonella sp.
韋榮球菌屬
方法4
Vibrio sp.
弧菌屬
方法10
注:Vibrio alginolyticus(溶藻弧菌應在哥倫比亞血瓊脂或胰蛋白胨大豆瓊脂上培養。
Virgibacillus sp.
枝芽孢菌屬
方法1
Yarrowia sp.
亞羅酵母屬
方法5
Yersinia sp.
耶爾森菌屬
方法1
Zygosaccharomyces sp.
接合酵母屬
方法5
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